دوره 2، شماره 1 - ( بهار 1395 )                   جلد 2 شماره 1 صفحات 31-37 | برگشت به فهرست نسخه ها


XML English Abstract Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Saeedi S, Nazemi A, Jafarpour M. Bacterial DNA Extraction Using Silica Gel: A New Method with High Quality and Simplicity. tjpm. 2016; 2 (1) :31-37
URL: http://tjpm.mazums.ac.ir/article-1-3519-fa.html
سعیدی سمانه، ناظمی علی، جعفرپور مصطفی. بهینه سازی استخراج DNA ژنومی باکتریایی به روش سیلیکاژل. مجله طب پیشگیری طبری. 1395; 2 (1) :31-37

URL: http://tjpm.mazums.ac.ir/article-1-3519-fa.html


گروه زیس تشناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تنکابن، تنکابن، ایران
چکیده:   (550 مشاهده)

سابقه و هدف:در عصر حاضر، آزمایشات مولکولی گسترش بسیاری پیدا نموده است. اولین گام
در موفقیت این آزمایشات استخراج صحیح اسید نوکلئیک می باشد. در این مطالعه، دستور کاری
برای استخراج DNA براساس سلیکا ارائه گردیده است. خالص سازی DNA براساس تکنولوژی غشاء
سیلیکاژل یک روش ساده و شامل سه مرحله اتصال، شستشو و بازیابی می باشد. اسیدهای نوکلئیک
برخلاف پلی ساکاریدها و پروتئی نها، در حضور نمک های کائوتروپیک ( Ciportoahc ) جذب سلیکا
می شوند و با شستشو حذف م یگردند. پس از مرحله شستشو، اسیدهای نوکلئیک خالص سازی
شده، ب هوسیله شستشو با بافر یا آب مقطر از سیلیکا جدا و بازیابی م یگردند؛ بنابراین هدف از این
مطالعه معرفی یک روش استخراج DNA با کیفیت بالا و ساده است.
مواد و روش ها: در این مطالعه 8 نمونه باکتری شامل 3 باکتری گرم مثبت و 5 باکتری گرم منفی
مورد بررسی قرار گرفت. استخراج DNA تمام نمونه ها براساس سلیکا محلول انجام گردید. مقدار
چگالی نوری( DO ) آ نها با استفاده دستگاه بایوفتومتر سنجیده شده و برای تعیین کیفیت هر نمونه
پس از استخراج، نمونه ها بر روی ژل آگارز برده شدند. جذب نوری در 280/260 mn به طور میانگین
1/29 بوده و الکتروفورز از محصولات PCR بر روی ژل آگارز 5/ 1 درصد انجام گردید.
یافته ها: متوسط جذب DNA در 260/280 mn از DNA باکتری های گرم منفی و باکتری های
گرم مثبت استخراج شده از سلول های خونی، به ترتیب 1 و 25 / 1 بود. براساس نتایج به دست آمده
الکتروفورز ژل آگارز از محصولات PCR بهره وری بالایی داشت.
نتیجه گیری: نتایج مطالعه حاضر نشان داد که این روش کاری برای باکتری های گرم منفی در
مقایسه با باکتری های گرم مثبت بهره وری بیشتری دارد و روش ژل سیلیکا محلول یک روش
ساده، ارزان و با کیفیت مناسب می باشد. با این حال این روش معایبی دارد که با تغییر در روش
کار مانند: افزایش زمان، دفعات شستشو و تغییر در زمان اثردهی آنزی مها و ... می توان کیفیت آن
را افزایش داد.

واژه‌های کلیدی: سلیکا ژل، استخراج DNA باکتریایی
متن کامل [PDF 532 kb]   (690 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي-کامل | موضوع مقاله: بهداشت
دریافت: ۱۳۹۵/۴/۱۵ | پذیرش: ۱۳۹۵/۴/۱۵ | انتشار: ۱۳۹۵/۴/۱۵

ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
کد امنیتی را در کادر بنویسید

ارسال پیام به نویسنده مسئول


کلیه حقوق این وب سایت متعلق به مجله طب پیشگیری طبری می باشد.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق

© 2015 All Rights Reserved | Tabari Journal of Preventive Medicine

Designed & Developed by : Yektaweb